ارزیابی حساسیت و ویژگی روش تکثیری بر پایه اسید نوکلئیک با روش های میکروسکوپی توام با کشت و rt-pcr برای تشخیص عامل لیشمانیوزیس جلدی

چکیده زمینه و هدف: روش میکروسکوپی همراه با کشت، روش استاندارد طلایی برای تشخیص انگل لیشمانیا است . استفاده از روش های ملکولی از جمله روش rt-pcr برای تشخیص این بیماری در مقایسه با روش های میکروسکوپی از حساسیت و ویژگی بالاتری برخوردار است. اما با توجه به گرانی تجهیزات آن و زمانی که برای انجام آن صرف می-شود به صورت گسترده مورد استفاده قرار نمی گردد. استفاده از روش تکثیری بر پایه ی اسید نوکلئیک (nasba) به دلیل عدم نیاز به دستگاه ترموسایکلر و همچنین شناسایی انگل زنده، دارای ارزش بالایی است. هدف از این مطالعه، بررسی حساسیت و ویژگی nasba برای تشخیص ملکولی عامل لیشمانیوزیس جلدی می باشد. روش بررسی: از 28 نمونه زخم پوستی مشکوک به لیشمانیوزیس جلدی، rna انگل استخراج شد. سپس به کمک پرایمرهای اختصاصی طراحی شده برای ناحیه ی 18srrna لیشمانیا، این ناحیه به وسیله ی واکنش ایزوترمال nasba مورد تکثیر قرار گرفت و در جهت افزایش حساسیت، محصول واکنش تکثیری به وسیله پروب فلورسانس ملکولی syber gold در بافر tbe(1x) الکتروفورز شد. همچنین با استفاده از پرایمرهای اختصاصی، بر روی نمونه ها واکنش rt-pcr نیز انجام شد. یافته ها: دراین مطالعه روش nasba و روش rt-pcrبرای تشخیص انگل لیشمانیا در زخم به ترتیب از حساسیت 81 درصد و 51 درصد و ویژگی 100 درصد برخوردار بودند. نتیجه گیری: روش ایزوترمال nasba با حساسیت و ویژگی بالا به منظور شناسایی لیشمانیوز جلدی می توان استفاده کرد. واژه های کلیدی: لیشمانیوزیس جلدی، nasba، 18s rrna